Vitamina B12 exerce um efeito benéfico sobre a espermatogênese após depleção de espermatogônias causada pelo Busulfan®

Abstract

Busulfan® é um quimioterápico que provoca danos aos tecidos que apresentam intensa divisão celular, como o epitélio seminífero. Considerando que a vitamina B12 contribui na síntese de DNA, este estudo avaliou os efeitos da suplementação com vitamina B12 após a depleção das espermatogônias com Busulfan®. Foram usados 64 ratos, distribuídos em oito grupos (n=8/grupo). Alguns grupos receberam injeções intraperitoneais diárias de 3μg de vitamina durante 10 (GB, GVVit, GRec e GVRec1) ou 17 dias (GRecVit e GVRec-2). Nos animais dos grupos GB, GRec e GRecVit, injeções intraperitoneais de 10 mg/Kg de Busulfan® foram administradas no 1º e 4º dias de tratamento. Os grupos GVVit, GVRec1 e GVRec2 receberam doses de polietilenoglicol também nos 1º e 4º dias. Alguns animais receberam polietilenoglicol (1º e 4º dias) e solução salina durante 10 (GV) ou 17 (GVRec-3) dias. Ao final dos tratamentos, o sangue dos animais foi coletado por punção cardíaca para realização do hemograma. Após eutanásia, os testículos foram removidos, processados para inclusão em parafina e em historesina. Nos cortes de historesina corados pela H&E, foram analisadas 45 secções tubulares por animal, em 5 animais dos grupos GRec, GRecVit, GVRec1, GVRec2, GVRec3, GV, GB e GVVit. As secções tubulares foram classificadas nos estágios I-VI, VII-VIII e IX-XIV (15 secções/estágio) e, de cada secção, as áreas tubular total e epitelial foram mensuradas. A frequência de túbulos alterados e o número de espermatogônias por túbulo foi contado. Os cortes incluídos em parafina foram submetidos à imuno-histoquímica para detecção de PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen). A análise do hemograma mostrou que os animais de GV, GVVit, GVRec1, GVRec2 e GVRec3 apresentaram quantidades de glóbulos brancos e plaquetas dentro dos valores de referência, enquanto que os animais de GB, GRec e GRecVit apresentaram diminuição significante em tais ...