Efeitos in vitro e in vivo do extrato de glândulas salivares de fêmeas de carrapatos Rhipicephalus sanguineus com 2 dias de alimentação sobre modelos tumorais

Abstract

In this study, tests were conducted to demonstrate the antitumor potential of salivary gland extract of female ticks Rhipicephalus sanguineus 2 (EGS2) days of feeding on the DH82 cell lines HL-60 and (in vitro), as well as the effects of two different concentrations (0,2 and 0,04μg/uL) extracts (one or two injections) obtained from the same glands of the same species at the same time of tick feeding on morphophysiology muscle of hind legs of female Wistar rats inoculated with Walker 256 tumor cells (in vivo). In vitro, tumor cells were exposed to concentrations of the extract for 24 hours and then forwarded to the quantitative assessments (analysis parameters and viability percentage of total cells) and morphology (analysis under conventional light microscopy: hematoxylin and eosin and under confocal microscopy: marking cytoskeletal / core check cell viability, as well as the detection of the activity of caspases 3 and 7). The quantitative results show that the extract EGS2 adversely affects both the viability as the proliferation of tumor cells, and the concentration of 0,2 reduced the viability of DH82 and 0,5 reduced the proliferation of these. For HL-60 concentrations of 0,2 and 0,5 reduced the viability still being the concentration of 0,5 was most effective in this process. Morphological data showed that both DH82 (exposure to 0,2 mg / mL of EGS2) and HL-60 (exposure to 0,2 to 0,5 mg / mL of EGS2) had impaired viability, or in such concentrations there was death of EGS2 cell, which occurred earlier in DH82 (presence of large blocks containing cell debris). Moreover, it was detected cytoplasmic and nuclear changes resulting from exposure to the extracts, which were: a) disruption of the cytoskeleton (actin and tubulin), b) condensation of chromatin and concentration in blocks or distributed throughout the core or only on its periphery (chromatin marginalization), pyknosis, training blebbs and nuclear fragmentation, c) activity of...

No presente trabalho foram realizados testes para demonstrar o potencial antitumoral de extratos de glândulas salivares de fêmeas de carrapatos Rhipicephalus sanguineus com 2 (EGS2) dias de alimentação sobre células das linhagens DH82 e HL-60 (in vitro) , bem como os efeitos de duas concentrações diferentes (0,2 e 0,04μg/μL) de extratos (com uma ou duas injeções) obtidos a partir das mesmas glândulas da espécie de carrapato com o mesmo tempo de alimentação sobre a morfofisiologia da musculatura de pernas posteriores de ratas Wistar inoculadas com células do tumor de Walker 256 (in vivo). In vitro as células tumorais foram expostas às concentrações do extrato pelo período de 24 horas e então encaminhadas para as avaliações quantitativa (análise dos parâmetros viabilidade e o número total de células) e morfológica (análises sob microscopia de luz convencional: coloração pela hematoxilina e eosina, e sob microscopia confocal: marcação do citoesqueleto/núcleo, verificação da viabilidade celular, bem como detecção da atividade das caspases 3 e 7). Os resultados quantitativos mostraram que o extrato EGS2 afetou negativamente tanto a viabilidade quanto a proliferação das células tumorais, sendo que a concentração de 0,2 reduziu a viabilidade das DH82 e a de 0,5 reduziu a proliferação destas. Para as células HL-60 as concentrações de 0,2 e de 0,5 reduziram a viabilidade, sendo ainda que a concentração de 0,5 foi mais eficaz nesse processo. Os dados morfológicos revelaram que tanto as DH82 (exposição a 0,2 μg/mL do EGS2) quanto as HL-60 (exposição a 0,2 e 0,5 μg/mL do EGS2) tiveram a viabilidade comprometida. Além disso, detectou-se alterações citoplasmáticas e nucleares como: a) desorganização do citoesqueleto (actina e tubulina), b) condensação e concentração da cromatina em blocos distribuídos ou por todo o núcleo ou somente na sua periferia (marginalização cromatínica), picnose...