Produção deficiente de citocinas Th1 em camundongos BALB/c jovens

Abstract

O objetivo do presente estudo foi comparar a produção de IFN-γ, IL-12 e IL-4 entre camundongos jovens (5, 12 e 19 dias de idade) e adultos (30 dias de idade). As avaliações foram feitas por estimulação, in vitro, de células esplênicas com Concanavalina A (ConA) , Staphylococcus aureus (S. aureus) e lipopolissacarídeo (LPS). Diferentes concentrações de cada estímulo foram testadas e os sobrenadantes das culturas foram coletados após 48 horas de incubação e as concentrações de IFN-γ, IL-12 e IL-4 determinadas por ELISA. Células de camundongos jovens e adultos produziram níveis igualmente elevados de IFN-γ após estímulo com ConA. Somente animais adultos produziram IFN-γ em resposta ao estímulo com S. aureus. Em culturas estimuladas com LPS, a produção desta citocina foi baixa e similar nos animais jovens e significativamente elevada nos animais adultos. Somente células de animais adultos estimuladas com S. aureus foram capazes de produzir IL-12. O único estímulo capaz de induzir níveis detectáveis de IL-4 foi ConA, sendo que estes níveis foram mais elevados nos animais com 12 e 19 dias de idade em comparação com animais neonatos e adultos. A diminuição das doses ótimas dos estímulos não mudou o perfil de produção de cada citocina nos animais jovens. Estes resultados permitem concluir que a idade afeta a produção de citocinas: ocorre maior produção de IL-4 em camundongos jovens e maior produção de IL-12 e IFN-γ em animais adultos. Estas informações são importantes devido ao papel destas citocinas na polarização das respostas imunes nos sentidos Th1 e Th2. Palavras-chave: camundongo; citocina; interferon-gama; interleucina-4; interleucina-12.

In this paper we compare cytokine production (IFN-γ, IL-12 and IL-4) by young (5, 12 and 19 days old) and adult (30 days old) BALB/c mice. Cultures of spleen cells isolated from these mice were stimulated with Concanavalin A (ConA), Staphylococcus aureus (S. aureus) and lipopolysaccharide (LPS); three different doses of each stimulus being tested. Culture supernatants were collected 48 h later and cytokine concentrations determined by ELISA. ConA induced similarly high IFN-γ levels in cultures derived from both young and adult mice, but only adult animal cells produced IFN-γ after stimulation with S. aureus. On the other hand, LPS stimulation significantly raised IFN-γ production in adults, while this cytokine remained at a low level in young mice. IL-12 production was induced only by S. aureus and only in adult cells. IL-4 production was only observed in ConA-stimulated cultures, where its levels were similarly low in cells from 5- and 30-day-old mice but significantly higher in 12- and 19-day-old animal cultures. Addition of a smaller dose of each stimulus did not change the profile of cytokine production. We conclude from these results that cytokine production was affected by age: higher IL-4 production was observed in cells from young mice whereas higher IFN-γ and IL-12 production was associated with adult animals. This information is highly relevant in that these cytokines are directly involved in Th1 / Th2 polarization.