Ação da luz ultravioleta e da riboflavina na inativação da Leishmania infantum chagasi em sangue canino conservado em bolsas para transfusão

Abstract

É de extrema importância para a medicina transfusional que haja segurança no procedimento de transferência de hemocomponentes, minimizando a ocorrência da transmissão de patógenos. O presente trabalho visa caracterizar as possíveis alterações hematológicas e bioquímicas, ocorridas durante o período de 21 dias de armazenamento das amostras de sangue canino colhidas em bolsas plásticas para transfusão, investigando ainda a eficiência do tratamento destas bolsas com luz ultravioleta e riboflavina na inativação de Leishmania infantum chagasi. Para isto, realizou-se hemograma, teste de fragilidade osmótica, determinação da concentração sérica de sódio e potássio, testes sorológicos e moleculares, comparando-se um grupo de bolsas de sangue colhidas de cães parasitados com L. infantum chagasi, com um grupo de bolsas de sangue obtidas de cães hígidos. Após as análises laboratoriais in vitro, o sangue canino parasitado foi submetido ao tratamento com riboflavina e luz UV por 30 e 45 minutos e inoculado em hamsters. O sangue de cães com leishmaniose armazenado em bolsas para transfusão demonstrou: anemia, hiperproteinemia, trombocitopenia, hipercalemia, diminuição do pH, 100% das RIFIs positivas (título 1:640) e PCR convencional positiva em 20% dos animais, demonstrando a importância do hemograma, exames bioquímicos e dos testes laboratoriais de diagnóstico da leishmaniose na seleção dos doadores. O sangue parasitado não perdeu a capacidade de produzir a infecção após o período de armazenamento. Os hamsters inoculados com sangue tratado com riboflavina e luz UV por 30 e 45 minutos apresentaram PCR positiva, apesar de não apresentarem sinais e sintomas clínicos da enfermidade. Na qPCR pode-se identificar que a associação da riboflavina com a luz UV reduziu o número de leishmanias, diminuindo a carga parasitária, porém não eliminou completamente os parasitas

Providing safety during the transfusion of blood products is of major importance in transfusion medicine; this requires a proper blood to minimize the occurrence of pathogen transmission. The present work aims to characterize the possible hematological and biochemical changes that occurr during the 21 days of storage of canine blood samples collected in plastic bags for transfusion and to investigate the treatment efficiency of these bags with ultraviolet light and riboflavin in inactivating Leishmania infantum chagasi. Total blood count, osmotic fragility test, determination of serum sodium and potassium, serological and molecular tests were performed comparing a group of bags of blood taken from dogs infected with L. infantum chagasi, with a group of bags of blood obtained from healthy dogs. After this, the parasitized canine blood was subjected to the treatment with riboflavin and UV light for 30 to 45 minutes and inoculated in hamsters. The blood of dogs with leishmaniasis stored in bags for transfusion showed anemia, hyperproteinemia, thrombocytopenia, hyperkalemia, decreased pH, 100 % of RIFIs positive (1:640 title) and conventional PCR positive in 20% of animals, demonstrating the importance of blood count, biochemical tests and laboratory tests for the diagnosis of leishmaniasis in blood donor selection. The parasitized blood has not lost the ability to produce infection after the storage period. Hamsters inoculated with blood treated with riboflavin and UV light for 30 and 45 minutes were PCR positive, although not presenting clinical signs and symptoms of the disease. The qPCR can identify that the combination of riboflavin with UV light reduced the number of Leishmania, reducing the parasitic load, but did not completely eliminate parasites