Aspectos epidemiológicos, clínicos e avaliação dos métodos diagnósticos nas fases de evolução da brucelose em ovinos inoculados experimentalmente com Brucella ovis

Abstract

O objetivo do presente estudo foi avaliar a patogenicidade e o potencial infectante da Brucella ovis REO 198 em carneiros inoculados experimentalmente, estudar o perfil sorológico destes animais e associa-los aos sinais clínicos, analisando o teste de imunodifusão em ágar gel e soroaglutinação rápida. Adicionalmente, adaptar e avaliar uma técnica de PCR frente ao cultivo bacteriano em diferentes materiais. Foram utilizados 36 carneiros, sendo 31 submetidos à inoculação via conjuntival e via intraprepucial de uma solução contendo 2x109 UFC/mL de B. ovis REO 198, simultaneamente e cinco submetidos a inoculação, pelas mesmas vias, de solução fisiológica, mantidos como grupo controle. Todos os animais inoculados foram submetidos, semanalmente, à avaliação clínica, colheita de sangue para diagnóstico sorológico, sêmen e urina para cultivo e realização da PCR. Sorologia positiva foi observada nos animais, por ambas as provas, a partir da 2ª semana, observando-se flutuações de títulos. Alterações clínicas se iniciaram a partir da 5ª semana pós-inoculação estando associada à sorologia positiva na fase aguda da enfermidade. Eliminação de B.ovis pode ser observado por cultivo e PCR nas amostras de sêmen e urina de modo intermitente. Infecção natural foi observada em três animais não inoculados e contactantes eventuais do grupo inoculado experimentalmente. Destaca-se o caráter patogênico e infectante da Brucella ovis REO 198, a importância das excreções destes animais como vias de eliminação e a condição destes como potenciais fontes de infecção. A IDGA demonstrou ser a mais favorável no uso como diagnóstico de rotina, enquanto a SAR diagnosticou apenas animais na fase aguda da doença. A PCR de sêmen ou urina dos animais associada ao cultivo microbiológico demonstrou melhor sensibilidade de detecção, sugerindo a associação das técnicas para um diagnóstico eficiente.

The objective of the present study was to evaluate the pathogenicity and infective potential of B. ovis REO 198 and to determine the serological profile of rams experimentally inoculated using immunodiffusion in agar gel and rapid serum agglutination test associated with clinical signs, as well as to adapt and evaluate PCR compared with microbiological culture in the different samples. Thirty one rams, 1-2 years old, were submitted to conjunctival and intrapreputial simultaneous inoculation with a solution containing 2x109 CFU/mL B. ovis REO 198. The other five animals constituted the control group and were inoculated by the same routes with sterile saline solution. All animals inoculated were weekly submitted to clinical evaluation, as well as collection of blood for serological diagnosis, and collection of semen and urine for culture and PCR. Positive serology was observed beginning in the third week, and decreasing soon after the fifth week after inoculation. Both tests detected fluctuations in titers. Clinical alterations began in the 5th week after inoculation and were associated with positive serology in the acute phase of the disease. B. ovis was observed in semen and in urine culture in an intermittent manner. Natural infection was observed in three non-inoculated animals that occasionally contacted animals of the infected group. The pathogenic and infective characteristics of B. ovis REO 198 were highlighted, as well as the importance of animal excretion as routes of elimination, and the condition of the animals as potential sources of infection. IDGA showed variable sensitivity in the different periods, detecting positive animals in the chronic phase of the disease, and was the preferred method to be used in routine diagnosis, whereas SAR just diagnosed animals in the acute phase of the disease. The semen or urine PCR associated to microbiological culture is recommended for an efficient diagnosis.