Citotoxicidade direta e transdentinária da clorexidina sobre células odontoblastóides MDPC-23 e análise de sua atividade antimicrobiana in vitro

Abstract

O objetivo da presente pesquisa foi avaliar o efeito citotóxico direto e transdentinário de diferentes concentrações de clorexidina (CHX), bem como sua atividade antibacteriana. Para isto, concentrações de 0,06%; 0,12%; 0,2%; 1% e 2% de CHX foram aplicadas sobre células odontoblastóides MDPC-23 em cultura (teste direto). Além disto, as concentrações de CHX também foram aplicadas sobre a superfície oclusal de discos de dentina de 0,5mm ou 0,2mm de espessura, os quais apresentavam células MDPC-23 cultivadas sobre sua superfície pulpar (teste indireto). O metabolismo e morfologia celular foram avaliados pelo teste de MTT e pela análise em MEV, respectivamente. O potencial antibacteriano da CHX foi avaliado sobre S.mutans com e sem interposição de discos de dentina. Os dados numéricos obtidos dos experimentos realizados foram submetidos à análise estatística. A redução do metabolismo celular provocado pela CHX mostrou-se dose e tempo dependentes. Foi demonstrado ainda que quanto menor a espessura do disco de dentina e maior a concentração da CHX, mais intensos são os efeitos tóxicos deste agente químico sobre as células pulpares em cultura, e mais efetiva é a atividade antibacteriana da CHX sobre S.mutans. Foi possível concluir que o intenso efeito tóxico direto observado para a CHX é notavelmente reduzido pela interposição de barreiras de dentina, cuja espessura interfere no metabolismo das células pulpares MDPC-23. Além disso, a CHX difunde através dos túbulos dentinários exercendo efeito antibacteriano contra S.mutans.

The aim of this in vitro study was to evaluate the direct and transdentinal cytotoxicity of different concentrations of chlorhexidine (CHX) and its antibacterial activity. The following concentrations of CHX: 0.06%; 0.12%; 0.2%; 1%; and 2% were applied directly on odontoblast-cell line MDPC-23 or on the occlusal surface of dentin discs (0.5mm or 0.2mm thick) which presented pulp cells seeded on their pulpal surface. Cell metabolic activity and morphology were evaluated by MTT assay and SEM, respectively. The influence of dentin thickness on the antibacterial activity of CHX against S. mutans was also assessed. The data were submitted to the statistical analysis of Mann-Whitney. Reduction in the cell metabolism from 42% to 78% was observed according to the concentration of CHX and its period of application on the cells. Therefore, the direct cytotoxicity of CHX is dose and time dependent. It was also observed that the most intense toxic effects occurred as thicker was the dentin disc and as higher was the concentration of CHX. Antibacterial activity against S. mutans was observed to the highest concentration of CHX. It was concluded that the intense cytotoxicity of all concentrations of CHX applied directly on the MDPC-23 cells is notably reduced by the presence of dentin discs interposed between this chemical agent and the cultured cells. In addition, the transdentinal diffusion of CHX causes antibacterial activity against S. mutans.