Influência do estado diabético na doença periodontal induzida em ratos: análise metabólica, genética e radiográfica

Abstract

Evidências sugerem existir correlação positiva entre diabetes mellitus e destruição periodontal. Com intuito de estudar a influência do Diabetes Mellitus sobre a evolução da doença periodontal induzida, o presente estudo apresenta como objetivos, avaliar alterações metabólicas como, peso corporal, níveis séricos de cálcio, fósforo e fosfatase alcalina, alterações macroscópicas e óssea, e a expressão tecidual de mieloperoxidase e das citocinas IL-1β, IL-6, TNF-α, IFN-γ. Foram utilizados ratos machos Wistar divididos em 4 grupos de 24 ratos, sendo: Grupo I controle; Grupo II diabético; Grupo III controle com doença periodontal induzida e Grupo IV diabético com doença periodontal induzida. Após dois dias da confirmação do estado diabético induzido por estreptozotocina, foi realizada a colocação da ligadura. Oito animais de cada grupo foram sacrificados nos períodos experimentais de 3, 7, 15 e 30 dias após colocação da ligadura. Foi utilizado testes bioquímicos para avaliação das enzimas séricas, lupa esteroscópica para análise macroscópica, programa analisador de imagens digital para mensuração da perda óssea, leito de ELISA para determinar a concentração de MPO e Real-time PCR para expressão das citocinas. Os resultados demonstraram que o estado diabético perdurou até o final do experimento nos grupos II e IV, com níveis glicêmicos elevados. Dentre os marcadores bioquímicos, somente a ALP apresentou-se estatisticamente maior nos grupos diabéticos (II e IV). Macroscopicamente, houve diferença somente entre os grupos com e sem doença periodontal, independente da presença do diabetes, com maior alteração tecidual, caracterizada por migração apical da gengiva marginal, perda de contorno marginal e de tecido interdental, nos períodos tardios de periodontite (15 e 30 dias).

Evidences suggest the existence of a positive correlation between diabetes mellitus and periodontal collapse. In order to evaluate the influence of Diabetes Mellitus on the progression of periodontal disease induced in rats, the objective of the present study was to verify glycemic, calcium, phosphorus and alkaline phosphatase serum levels, to evaluate tissue and alveolar bone loss, myeloperoxidase (MPO) gingival levels, as IL-1β, IL-6, TNF-α, IFN-γ tissue expression. Wistar male rats were used in this study. They were divided into 4 groups of 24 rats each, as follows: Group I – control; Group II – diabetic; Group III – control with periodontal disease induced; and Group IV – diabetic with periodontal disease induced. After streptozotocin diabetic state was confirmed, a ligature was placed on the mandibular first molar teeth of Groups III and IV rats. Eight animals of each group were killed at the experimental periods of 3, 7, 15 and 30 days after the ligature placement. Was used biochemical tests for evaluation of serum enzymes, magnifying glass to macroscopic analysis, digital image analyzer program for measurement of bone loss, ELISA to determine the concentration of MPO and Real-time PCR for expression of cytokines. Results demonstrated that the diabetic state lasted up to the end of the experiment at groups II and IV. Significant increases in serum alkaline phosphatase were observed at diabetic groups (II and IV). Macroscopically, in the groups where periodontal disease was induced, it was possible to observe more tissue alterations and it was higher in the 30-day experimental period. The MPO levels were significantly higher in induced periodontitis groups (III and IV) (p<0.05). The Group IV showed higher bone loss significantly when compared to the other groups (p < 0.05). The cytokines IL-6 and IFN-γ were elevated in groups III and IV at 30 ° day. The cytokine IL-1β was reduced at group II.