β- glucanas de Lasiodiplodia theobromae MMBJ: avaliação da atividade imunomoduladora e como filme transportador de fármaco

Abstract

Polysaccharides are employed in various industries as thickeners, detergents, laxatives, fiber and food toppings . New research has focused on the anti - mutagenic anti-inflammatory and imunomodulator potential of microbial exopolysaccharides (EPS), as well as in their application in controlled drug delivery systems. Several studies have employed fungal β -glucans and verified high biological activity. The goal of this project is to study the immunomodulatory action of EPS produced by Lasiodiplodia theobromae, evaluate the ability to act as drug carriers of blends formed by exopolysaccharide and latex and also some mechanical properties of these blends. The micro-organism was grown on Vogel medium with sucrose 50 g / L at 28 ° C, 180 rpm for 72 h. The EPS was precipitated with ethanol ( 3:1 v/v), dialyzed and purified by freezing / thawing and ultrafiltration. The yield of EPS in each culture was on average 1.9 g / L. The study of the immunomodulating effects was performed in vitro, only with the fraction of EPS β- glucan ( 1 → 6 ) purified by adding different concentrations of polysaccharide in human U937 macrophages lineage and verifying cell viability and cytokine ( TNF - α and IL – 10 profile ). Concerning the tests of immunomodulation, the EPS purified β- glucan ( 1 → 6 ) has shown to be capable of activate the macrophage response to the release of TNF - α cytokine in the first 24h , decreasing after 48h, without showing response activation of IL - 10 , which suggests a pro-inflammatory and anti- tumor response. The films were evaluated for thickness, moisture loss, water solubility and mechanical strength. The evaluation of the films as a carrier of drugs was performed by the addition of ketoprofen to EPS and latex blend, and monitoring of drug release by spectrophotometry. The films presented thicknesses between 2 and 3.5 mm; minimal moisture loss (between 0.5 and 3%); solubility varying from 3 to 6,5 and good mechanical...

Polissacarídeos são empregados em diversos segmentos industriais como espessantes, detergentes, laxantes, fibras, e coberturas de alimentos. Novas pesquisas tem enfocado o potencial anti-inflamatório, anti-mutagênico e imunomodolador de exopolissacarídeos (EPS) microbianos, bem como sua aplicação em sistemas de liberação controlada de medicamentos. Diversas pesquisas têm empregado β-glucanas fúngicas e verificado diversas atividades biológicas. O objetivo do presente projeto foi estudar a ação imunomoduladora do EPS de Lasiodiplodia theobromae, avaliar a capacidade do exopolissacarídeo na forma de blendas com látex de atuarem como carreadores de medicamentos e algumas propriedades mecânicas do EPS em blendas com látex. O micro-organismo foi cultivado em meio Vogel, com sacarose 50 g/L, a 28°C, 180 rpm, por 72 h. O EPS foi precipitado com etanol (3:1v/v), dialisado e purificado por congelamento/degelo e ultrafiltração. O rendimento em EPS em cada cultivo foi em média de 1,9 g/L. A ação imunomoduladora in vitro foi realizada apenas com a fração de EPS β- glucana (1→6) purificada, adicionando diferentes concentrações de polissacarídeo a macrófagos humanos de linhagem U937 e verificando-se viabilidade celular e perfil de citocinas (TNF-α e IL-10). Quanto aos ensaios de imunomodulação, o EPS purificado β- glucana (1→6) se mostrou capaz de ativar a resposta de macrófagos com a liberação da citocina TNF-α nas primeiras 24h , decaindo em 48h, sem apresentar ativação da resposta de IL-10, o que sugere uma resposta pró-inflamatória e anti-tumoral. Os filmes foram avaliados quanto a espessura, perda de umidade, solubilidade em água e resistência mecânica. A avaliação dos filmes como carreador de medicamento foi realizada pela adição de cetoprofeno a blenda EPS e látex, e acompanhamento da liberação do fármaco por espectrofotometria Os filmes apresentaram espessuras entre 2 a 3,5 mm; mínima perda de...