Establishment of peritoneal liquid electrophoretogram from healthy horses and horses submitted to experimentally induced intestinal obstruction

Abstract

The initial inflammatory stages of the colic syndrome include changes known as acute phase response. The aim of this study was to contribute with the establishment of reference values concerning the electrophoretogram of peritoneal liquid from healthy horses and horses submitted to experimentally induced intestinal obstruction. Twenty-one horses were allotted in four groups: duodenal obstruction (DG), ileum obstruction (IG), left-dorsal colon obstruction (MG), and control group (CG). Peritoneal liquid was sampled before obtruction (T0), with 3 hours of obstruction (T3) and 6, 30, 102 and 174 hours after desobstructing (T6, T30, T102 and T174, respectively). Total protein levels were determined by the biuret method and protein fractions were obtained by SDS-PAGE electrophoresis. The acute phase proteins (APP) identified were Immunoglobulin-A, ceruloplasmin, transferrin, albumin, α1-antitrypsin, heavy and light chains of immunoglobulin-G, haptoglobin, α1-acid glycoprotein and a still unnamed protein, which was called P24. There was no difference (P>0.3) in protein levels among groups, although a significant difference (P>0.05) was observed between distinct experimental moments in each group evidencing a higher response of the APP in the obstructed groups. The APP fractioning of the peritoneal liquid was standardized to establish a standard curve for healthy equines and those submitted to induced intestinal obstruction. Moreover, it was verified that the SDS-PAGE electrophoresis was sensitive and effective to help diagnose abdominal inflammatory processes.

Na cólica equina, os estágios iniciais da inflamação incluem alterações denominadas resposta de fase aguda. O objetivo deste estudo foi contribuir para o estabelecimento de valores de referência do proteinograma do líquido peritoneal de equinos hígidos e daqueles submetidos à obstrução intestinal experimental. Vinte e um animais foram distribuídos nos grupos: obstrução de duodeno (GD), íleo (GI), cólon dorsal esquerdo (GM) e controle instrumentado (GC). As colheitas das amostras de líquido peritoneal foram realizadas antes (T0), durante as obstruções (T3) e após as desobstruções (T6, T30, T102 e T174 horas). A proteína total foi determinada pelo método do biureto, e as frações proteicas obtidas por eletroforese em SDS-PAGE. Identificaram-se as proteínas de fase aguda (PFA): IgA, ceruloplasmina, transferrina, albumina, α1-antitripsina, cadeias pesada e leve de imunoglobulina-G, haptoglobina, alfa-1-glicoproteína ácida e uma proteína nominalmente não identificada, que foi chamada P24. Não houve diferença (P>0.3) nas concentrações proteicas entre os grupos, somente entre tempos dentro de cada grupo (P>0.05), evidenciando uma resposta maior das PFA dos grupos obstruídos. O fracionamento eletroforético das PFA, presentes no líquido peritoneal, foi padronizado de modo a estabelecer a curva-padrão para equinos hígidos e para aqueles submetidos à obstrução intestinal; ademais, verificou-se que o referido fracionamento proteico mostrou-se sensível e eficaz no auxílio ao diagnóstico de processos inflamatórios abdominais.