Indução de morte celular por apoptose decorrente da irradiação com Raios-X: um ensaio com células mamárias humanas tumorais

Abstract

Apoptosis is a form of programmed cell death selectively removes abnormal cells, and thus contributes to maintaining the balance of the dynamics of cell reproduction. Therefore the verification of the occurrence of apoptotic cell death after a pathological stimulus is crucial for the analysis of the maintenance of normal cell cycle of a given tissue or organ. In this experiment were used cells lines human mammary tumor MDAMB231, T47, MCF7, which were irradiated with X-rays at a dose of 5 Gy in a time interval of 15 seconds, and filtration of 1mm aluminum. Samples containing the cells were grown in a specific culture medium, containing fetal bovine serum and growth factor, and two samples were prepared with each of the cell lines, one to be irradiated, and another that has not been irradiated, which denoted by negative control of the irradiation. The primary goal of the experiment was to verify and compare the rates of apoptosis in each cell lines, in which were irradiated and that were not irradiated, using flow cytometry as a method for detecting apoptotic cell death in together with specific markers annexin V and propidium iodide. Data from the readings made by flow cytometry were analyzed and interpreted using the software WinMDI statistical graph. By comparing the indices relating to the readings of positive and negative for specific markers of apoptosis, based on differences in the statistical data presented lectures regarding the cellular irradiated and not irradiated, collude cells in question once... (Complete abstract click electronic access below)

Apoptose é uma forma de morte celular programada que remove seletivamente células alteradas, e assim contribui para a manutenção do equilíbrio da dinâmica da reprodução celular. Portanto a verificação da ocorrência da morte celular por apoptose após um dado estímulo patológico é de crucial importância para a análise da manutenção do ciclo celular normal de um dado tecido ou órgão. Neste experimento foram utilizadas as linhagens de células mamárias humanas tumorais, MCF7, T47, MDAMB231, que foram irradiadas com raios-X a uma dose de 5 Gy em um intervalo de tempo de 15 segundos, e filtração de 1 mm de alumínio. As amostras com as células foram cultivadas num meio de cultura específico que continha soro fetal bovino e fator de crescimento, e foram preparadas duas amostras com cada uma das linhagens de células, uma para ser irradiada, e outra, que não foi irradiada, que se denotou por controle negativo da irradiação. O objetivo fundamental do experimento foi o de verificar e comparar os índices de apoptose em cada uma das linhagens de células, nas que foram irradiadas e nas que não foram irradiadas, utilizando a citometria de fluxo como método de detecção da morte celular por apoptose, em conjunto com os marcadores específicos anexina V e iodeto de propídeo. Os dados das leituras feitas pela citometria de fluxo foram analisados e interpretados através da utilização do software gráficoestatístico WinMDI. Através da comparação dos índices relativos às leituras de positivo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)