Desenvolvimento da técnica de MALDI Imaging utilizando tecidos animais

Abstract

Currently the study of important molecular compounds present in low abundance in some tissues has been a challenge for proteomic analysis classic. An analysis requires more exploratory investigation of small regions of a tissue or a group of cells. MALDI Imaging Technology (MSI) is an application of mass spectrometry facing the chemical analysis of intact tissues. Thus, advances in mass spectrometry MALDI being obtained by the integration of histology, the best methods and automation are the main tools of data analysis. This tool has become essential to analyze the spatial distribution of peptides and proteins throughout the tissue sections, providing an enormous amount of data with minimum sample preparation. Thus, the aim of this study was to develop the technique of MALDI Imaging using tissue from glioblastoma multiforme (GBM), a form of most common malignant tumor in the brain. For this we used the printer chemical ChIP-1000 (Chemical Inkjet Printer, Shimadzu) and mass spectrometer type Maldi-ToF-ToF (Axima Performance, Shimadzu), a search of the identifications were performed in databases such as SwissProt. We identified more than forty proteins with diverse functions such as proteins F-actin-capping and Thymosin to the structure and organization cellular and proteins such several Tumor necrosis factor receptor development-related pathology. The development of this technique will permit to carry-out proteomic analysis directly into the tissue, enabling earlier diagnosis of diseases, as well as the identification and characterization of potential biomarkers of disease.

Atualmente, o estudo de importantes compostos moleculares, presentes em baixa abundância em alguns tecidos animais, tem sido um grande desafio para as estratégias clássicas das análises proteômica. Uma análise mais exploratória exige a investigação mais aprofundada e direcionada em pequenas regiões do tecido estudado ou de um pequeno grupo de células. A tecnologia MALDI Imaging (MSI) é uma aplicação da espectrometria de massas voltada para a análise química de tecidos intactos. Desta forma, os avanços na espectrometria de massas do tipo MALDI estão sendo obtidos pela integração da histologia, com os melhores métodos de automação e os principais instrumentos de análise de dados. Esta ferramenta tem se tornado essencial para analisar a distribuição espacial de peptídeos e proteínas ao longo de cortes de tecidos, proporcionando uma enorme quantidade de dados com um tempo mínimo de manipulação e preparação da amostra. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi desenvolver a técnica de MALDI Imaging utilizando tecido de Glioblastoma multiforme (GBM), uma forma de tumor maligno muito comum no cérebro humano. Neste trabalho, a impressora química CHIP-1000 (Chemical Inkjet Printer, Shimadzu) e o espectrômetro de massas do tipo Maldi-ToF-ToF (Axima Performance, Shimadzu) foram utilizados, sendo que as proteínas identificadas foram obtidas utilizando o servidor público SwissProt. Aproximadamente, foram identificadas quarenta proteínas com diversas funções, dentre elas as proteínas F-actina e Thimosina, as quais estão relacionadas com a estrutura e organização celular, e proteínas como diversos Fatores de necroses tumorais, as quais estão relacionadas diretamente com a patologia analisada nesse estudo. O desenvolvimento dessa técnica proporcionou uma análise proteômica diretamente no tecido, favorecendo o desenvolvimento de testes diagnósticos...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)