Tumor venéreo transmissível espontâneo canino: a inserção do transposon line-1 no gene C-MYC e os critérios de malignidade

Abstract

O Tumor Venéreo Transmissível (TVT) é uma das neoplasias mais antigas e em contínua propagação entre hospedeiros. É a segunda neoplasia mais diagnosticada em cães no Serviço de Patologia de Botucatu Dentre as alterações moleculares mais encontradas no TVT está o rearranjo do protooncogene c-MYC resultante da inserção do segmento de DNA repetitivo conhecido como LINE (Long Interspersed Element). O objetivo deste trabalho foi a identificação dos critérios citopatológicos de malignidade nos grupos linfocítóide e plasmocitóide pela técnica de Papanicolaou, a detecção do rearranjo LINE-1/c-MYC nas células do TVT e a realização do sequenciamento genético. Com a coloração de Papanicolaou, os critérios de malignidade nucleares mais observados foram espessamento da membrana nuclear, ranhura nuclear, nucléolo angular e halo perinucleolar. A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) amplificou um produto de 340pb em 100% das amostras analisadas e o sequenciamento genético confirmou a presença do rearranjo LINE-1/c-MYC. Concluiu-se que a especificidade desta alteração genética é indiscutível corroborando para mais estudos que permitirão o melhor entendimento quanto ao mecanismo de formação deste rearranjo. A coloração de Papanicolaou constituiu uma grande contribuição não apenas para o diagnóstico citológico do TVT, como também, ferramenta valiosa para evidenciação de critérios de malignidade que normalmente não são visualizados quando se utiliza corantes tipo Romanowsky. Para futuras investigações, este estudo poderá servir de esteio para correlacionar morfologia, critérios de malignidade e estudos moleculares ainda não realizados em conjunto para o TVT.

The Transmissible Venereal Tumor disease (TVT) is one of the neoplasias oldest and in continuous propagation between hosts and the second neoplasia more frequent diagnosed in dogs of in the Service of Pathology of Botucatu. Amongst the molecular alterations more frequently found in the TVT c-MYC resultant of the insertion of the repetitive segment of known DNA is the rearrangement of proto-oncogene as LINE (Long Interspersed Element). The objective of this work was the identification of the cytopathology criteria of malignancy in the groups linfocitóide and plasmocitóide for the technique of Papanicolaou, the detention of the LINE-1/c-MYC rearrangement in the cells of the TVT, and the accomplishment of the genetic sequencing. With the coloration of Papanicolaou, the observed nuclear criteria of malignancy more had been thicking of the nuclear membrane, nuclear groove, angular nucleolar and halo perinucleolar. The Reaction in Chain of Polimerase (PCR) amplified a product of 340pb in 100% of the analyzed samples and the genetic sequencing confirmed the presence of the LINE-1/c-MYC rearrangement and the degree of identity between the samples that 94% varied of 96%. Concluded that the especificidade of this genetic alteration is unquestionable corroborating for more studies that will allow optimum agreement how much to the mechanism of formation of this rearrangement. The Papanicolaou staining not only constituted a great contribution for the cytological diagnosis of the TVT, as well as, valuable tool for evideciacion of malignancy criteria that normally they are not visualized when Romanowsky type is used. For future inquiries, this study it will be able to serve of esteio to correlate morphology, criteria of malignidade and molecular studies not yet carried through in set for the TVT.