Efeito citotóxico transdentinário do peróxido de hidrogênio em diferentes concentrações sobre células de linhagem odontoblástica MDPC-23

Abstract

O objetivo da presente pesquisa foi avaliar in vitro os efeitos citotóxicos de diferentes concentrações de um agente clareador de ativação dual à base de peróxido de hidrogênio, sobre células de linhagem odontoblástica MDPC-23. Para isso, 50 discos de dentina com 0,5mm de espessura, obtidos de dentes terceiros molares humanos íntegros, foram tratados com EDTA 0,5 M, pH 7,4 por 1 minuto, sendo a condutância hidráulica (Lp; æL/mm2/min/cm H2O) determinada para cada um deles. Estes discos foram distribuídos em 5 grupos de acordo com os valores de permeabilidade. Os discos de dentina adaptados a um dispositivo metálico foram autoclavados, posicionados de maneira invertida (superfície pulpar dos discos voltados para cima) em recipientes plásticos de 24 compartimentos (wells). Então, 5 x 104 células MDPC-23/cm2 foram semeadas em cada compartimento. Após 72 horas de incubação na temperatura de 37º C, 5% de CO2 e 95% de ar, os dispositivos com os discos foram invertidos nos compartimentos, de tal maneira que os materiais experimentais pudessem ser aplicados (2 trocas de 15 minutos cada) sobre a superfície oclusal dos discos, caracterizando os 164 seguintes grupos experimentais: G1: H2O2 7,5%; G2: H2O2 20%; G3: H2O2 35%; e G4: gel base (sem o H2O2). No grupo controle (G5) os discos não foram tratados. Após esta etapa do experimento, o metabolismo das células MDPC-23 que permaneceram aderidas à superfície pulpar dos discos de dentina foi avaliado pela técnica de MTT. A morfologia das células e dentina tratada com os agentes experimentais foram avaliadas em microscopia eletrônica de varredura. A análise estatística de Kruskal-Wallis demonstrou que as três concentrações do agente clareador à base de H2O2 causaram intenso efeito citotóxico sobre as células MDPC-23. As concentrações de 7,5%, 20% e 35% de H2O2 aplicadas sobre os discos de dentina com 0,5mm... .

The aim of this in vitro study was evaluate the transdentinal effects of an experimental bleaching agent with different concentration of hydrogen peroxide on the immortalized odontoblast-cell line MDPC-23. Fifty dentin disks, 0.5mm thick, cut from extracted non-carious permanent third human molar were conditioned for 1 minute with 0.5M EDTA, pH 7.4 and the hydraulic conductance (Lp; æL/mm2/min/cm H2O) was determined. The dentin discs were adapted to a metallic device which were sterilized and placed in wells of 24-well dishes (the pulpal surface of the discs remained in up position). Then, the cells were plated (5 x 104 cells/cm2) on the pulpal surface of the discs and incubated for 72 hours at 37oC, with 5% CO2 and 95% air. The metallic devices with the adapted dentin discs were inverted into the wells in such way that the experimental bleaching agents were applied on the oclusal surface of the discs for 30 minutes (2 changes of 15 minutes). The different concentration of H2O2 present in the bleaching agent gave rise to the following experimental groups: G1: 7.5% H2O2; G2: 20% H2O2; G3: 35% H2O2; and G4: 0% H2O2. In control group the dentin discs were not 167 submitted to treatment. The metabolism of MDPC-23 cells which remained attached to the pulpal surface of the discs was evaluated by the methyltetrazolium assay (MTT) and the cell and dentin morphology was assessed under scanning electron microscope (SEM). The statistical analysis of Kruskal-Wallis determined that the experimental bleaching agent caused an intense cytotoxic effects on the MDPC-23 cells. This experimental agent containing H2O2 at 7.5%; 20%; and 35% concentration decreased the cell metabolism by 62.65%; 62.28%; and 65.69%, respectively. The complementary statistical test of Mann-Withney demonstrated no difference between groups 1 and 2. The bleaching agent with... (Complete abstract, click electronic address below).