Atividade fungicida de células dendríticas humanas contra o Paracoccidioides brasiliensis: papel dos metabólitos do oxigênio, citocinas e receptores de reconhecimento padrão

Abstract

Paracoccidioidomycosis (PCM) is a systemic mycosis caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis (Pb). The innate immune response plays a key role in the host / parasite relationship in fungal infections, with a focus on phagocytic cells, which mainly exert direct effector activities such as fungicidal and fungistatic. Accordingly, neutrophils, human monocytes and murine macrophages exert fungicidal activity against P. brasiliensis after activation with cytokines such as IFN-ƴ, TNF-α, GM-CSF and IL-15. This process involves the participation of O2 metabolites, particularly H2O2. Unlike these cells, dendritic cells (DCs) essentially play a modulatory role, since they are involved in the induction and instruction of the subsequent specific immune response. However, like other phagocytic cells, DCs release several cytotoxic molecules, which allow them to have equal capacity to perform direct effector activities. Greater or lesser capacity of DCs to destroy microorganisms can result in differences in the dissemination of the infection, during the migration of these cells from the periphery to the secondary lymphoid organs. In this study we asked whether human DCs exert fungicidal activity against P. brasiliensis and whether this process involves activation of NADPoxidase system, with consequent release of H2O2. We also aimed to evaluate the participation of different pattern recognition receptors (PRRs) and activating cytokines such as IFN-ƴ, GM-CSF and TNF-α in this activity. Different than expected, we detected that DCs do not exert fungicidal activity against P. brasiliensis; on the contrary, support growth of the fungus inside them, particularly when challenged with the virulent strain of Pb (Pb18) for 4 hours. This activity was not detected even after the activation process, since there was only a reduction in fungal growth when cells were pre-incubated with IFN-ƴ, GM-CSF or TNF-α. Furthermore, when cells were challenged for..

A paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis (Pb). A resposta imune inata desempenha um papel fundamental na relação hospedeiro/parasita nas infecções por fungos, com enfoque para as células fagocitárias, que exercem fundamentalmente atividades efetoras diretas como fungicida e fungistática. Nesse sentido, neutrófilos, monócitos humanos e macrófagos murinos exercem atividade fungicida contra o P. brasiliensis após a ativação com citocinas como IFN-ƴ, TNF-α, GM-CSF e IL-15. Esse processo envolve a participação dos metabólitos do O2, particularmente a H2O2. Diferente dessas células, as células dendriticas (DCs) têm um papel essencialmente modulador, isto é, de induzir e instruir a resposta imune específica subseqüente. No entanto, como as outras células fagocitárias, as DCs produzem importantes moléculas citotóxicas, permitindo que as mesmas potencialmente tenham igual capacidade de desempenhar atividades efetoras diretas. A maior ou menor capacidade das DCs destruírem os microrganismos pode resultar em diferenças na disseminação dos mesmos durante a migração dessas células da periferia até os órgãos linfóides secundários. Neste contexto, um dos objetivos do presente projeto foi avaliar se DCs humanas exercem atividade fungicida contra o P. brasiliensis e se esse processo envolve a ativação do sistema NADPoxidase com consequente produção de H2O2. Um segundo objetivo foi avaliar a participação de diferentes receptores de reconhecimento padrão (PRRs), assim como a de citocinas ativadoras como IFN-ƴ, GM-CSF e TNF-α nessa atividade. Detectamos diferente do esperado, que as DCs não desenvolvem atividade fungicida contra o P. brasiliensis; ao contrário, permitem o crescimento do fungo no seu interior, principalmente quando desafiadas com a cepa virulenta do Pb (Pb18) durante 4 horas. Essa atividade não foi detectada mesmo após o...